血型课堂创建于2008年11月27日
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抗人球蛋白试验(Coombs试验):
原理:抗人球蛋白试验又称Coombs试验,是检查温反应性抗体(不完全抗体)敏感的方法,是诊断自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的重要试验。在AIHA病人的血清中,常含有抗自身红细胞的不完全抗体,且多已与表面附有相应抗原的红细胞结合,使之成为致敏红细胞。加入用人血清球蛋白免疫家免所获得的抗人球蛋白血清, 抗人球蛋白抗体通过与红细胞表面的不完全抗体相结合,将已致敏的红细胞相互联接起来而出现肉眼可见的凝聚现象,此即抗人球蛋白直接试验阳性,用以证实病人红细胞表面有不完全抗体存在。间接试验是检查病人血清中有无游离的不完全抗体。先用Rho(D)阳性O型的正常人红细胞与病人的血清在37℃条件下致敏处理,如血清中存在游离的不完全抗体即被红细胞吸附成为致敏红细胞。然后加入抗人球蛋白血清,如出现凝集,即为抗人球蛋白的间接试验阳性。 正常人AB型血清中无这种免疫球蛋白,故无致敏作用,供作阴性对照血清。
Coombs试验分类为直接抗人球蛋白试验(DAT)和间接抗人球蛋白试验(IAT)。
直接Coombs试验:检测红细胞上的不完全抗体,红细胞在体内被致敏,即红细胞在体内已结合了抗体。直接加入Coombs抗体,红细胞发生凝集。
间接Coombs试验:检测血清中的游离抗体,红细胞在体外被致敏,即红细胞膜在体外试验时结合不完全抗体,然后加入Coombs抗体,红细胞发生凝集。
Coombs试验的应用:
直接抗人球蛋白试验:
1. 对新生儿溶血病(HDN)胎儿(婴儿)红细胞检测
2. 输血反应
3. 其它溶血性疾病
间接抗人球蛋白试验:
1. 检测体内不规则抗体,a. 妊娠妇女.b. 献血者.c. 受血者或有过输血史的.d. 交叉配血试验.
2. 对已发现抗体鉴定
3. 对一些血型抗原的检测,如D弱型,Kell. Duffy. Kidd 和其它血型检测。
临床意义:
① 正常人抗人球蛋白试验直接、间接试验均呈阴性。
② 温抗体型自身免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫溶血病常呈直接试验阳性反应。
③AIHA大多属于温抗体型(主要为IsG),但也有小部分属于冷抗体型(主要为ISM)。故必要时应在4℃条件下进行试验以检出其冷抗体,否则会导致假阴性反应。
④ 间接抗人球蛋白试验主要检测病人血清中有无不完全抗体,常用于 Rh或ABO型新生儿同种免疫溶血病的母体血清中不完全抗体的检测。
⑤ 本试验阳性还可见于 SLE、类风湿性关节炎、淋巴瘤、恶性肿瘤、甲基多巴等药物诱发的免疫性溶血性贫血等。
⑥ 本试验较易发生假阳性反应,因此阴性反应不能排除 AIHA。