血型课堂创建于2008年11月27日
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ABO血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。可利用红细胞凝集试验,通过正定型(血清试验)反定型(细胞试验)准确鉴定ABO血型。 所谓正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原,所谓反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。
正定型:用抗A、抗B血型试剂,检测红细胞上是否存在A、B抗原以确定血型的方法。
反定型:用A和B型试剂红细胞,检测血清中是否存在抗A、抗B抗体以确定血型的方法。
凝集:特异性抗体与相应抗原或其粒状载体呈块状的凝集。
ABO血型红细胞凝集试验:
A型:红细胞与抗A血型试剂凝集与抗B血型试剂不凝集;其血清与B型红细胞凝集,与A型、O型红细胞均不凝集。
B型:红细胞与抗B血型试剂凝集,与抗A血型试剂不凝集;其血清与A型红细胞凝集,与B型、O型红细胞均不凝集。
O型:在体外红细胞与抗A、抗B血型试剂均不凝集;其血清与A型和B 型红细胞均凝集、与O型红细胞不凝集。
AB型:红细胞与抗A、抗B血型试剂均凝集;其血清与A型、B型和O型红细胞均不凝集。
检测ABO血型所用试剂和材料:
1. 抗A(B型)、抗B(A型)及抗A、B(O型)分型血清,效价1:128。
2. 3%~5%A、B及O型试剂红细胞及抗A、B(O型)分型血清,效价1:128。
3. 受检者血清。
4. 受检者3%~5%红细胞盐水悬液。
检测ABO血型的方法有试管法和玻片法。
(1)试管法:
①取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A、B,用滴管分别加抗A、抗B和抗A、B分型血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%~5%红细胞盐水悬液1滴,混合。
②另取洁净小试管3支分别标明A,B和O型细胞,用滴管分别加入受检者血清1~2滴于底部,再分别以滴管加入A、B和O型3%试剂红细胞悬液1滴混匀。
③120g离心1分钟或1300g离心15秒。
④将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜检查。
⑤观察结果时,既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A,B亚型、类B或cisAB的发现。
(2)玻片法:
①清洁玻片一张(或白瓷版一块)。标明抗A、抗B和抗A、B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A、B分型血清1滴,再加受检者3%~5%红细胞悬液1滴,混合。
②另取洁净玻片一张(或白瓷板一块)。标明A细胞、B细胞和O型试剂,分别加红细胞悬液1滴。
③将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动(在室温18~22℃),使血清与细胞充分混匀连续约15分钟,以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。如以玻片试验时,也可用低倍镜观察结果。